تولید ویتامین 12B غیرنشان‌دار و نشان‌دار توسط باکتری استرپتومایسس گریزئوس

در این کار تحقیقاتی، تولید ویتامین 12B نشان‌دار با استفاده از گونه‌ای از اکتینومیست در یک محیط کشت جدید به روش تخمیر ناپیوسته مورد بررسی قرار گرفته است. پس از تولید و آزادسازی ویتامین 12Bاز سلول‌های میکروبی، محلول حاوی ترکیبات کوبالامین روی ستونی از رزین XAD-4 تثبیت شده و ستون توسط محلول‌های مختلف شسته شد. مقدار ویتامین 12B موجود در محلول خروجی از ستون، به روش کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا اندازه‌گیری شد و جهت تأیید وجود ترکیبات کوبالامین در نمونه‌ها، از روش کروماتوگرافی لایه‌ی نازک استفاده گردید. نتایج نشان داد که میزان تولید ویتامین 12B توسط این میکروارگانیسم 1456 میکروگرم در لیتر است. اتانول و استون، به عنوان بهترین محلول‌های شستشوی ستون برای جداسازی ویتامین 12B تعیین شدند. اندازه‌گیری‌های کروماتوگرافی لایه‌ی نازک نشان داد که مقادیر Rf سیانوکوبالامین و متیل کوبالامین تولید شده توسط باکتری با مقادیر استاندارد مطابقت می‌کنند. فعالیت ویژه‌ی 12B نشان‌دار، پس از انجام مراحل واجذب آن با استفاده از عوامل مختلف استن، الکل خالص، الکل 25% و آب، به ترتیب، برابر با 8.55 ، 6.90 ، 0.79 و 5.75  بکرل در میلی‌لیتر اندازه‌گیری شد. در نهایت، محلولی از 12B نشان‌دار با فعالیت ویژه‌ی 21.99 بکرل در میلی‌لیتر به دست آمد.